Mycoplasma canis (PCR) analýza, č. AN315BTK pro domácí mazlíčky, kočky a psy v Moskvě

Mykoplazmata jsou bakterie ze třídy Mollicutes, které nemají buněčnou stěnu o velikosti od 0,3 do 0,8 mikronů. Existuje více než 120 druhů mykoplazmat, ale vzhledem k obtížnosti druhové identifikace není zcela jasné, které z nich způsobují infekce u psů a koček. Mykoplazmata jsou komenzální mikroorganismy, které obývají sliznice téměř všech druhů savců. U psů jsou mykoplazmatické infekce obvykle charakterizovány lézemi genitourinárního systému, stejně jako keratokonjunktivitidou a/nebo patologiemi horních cest dýchacích, lézemi kůže a měkkých tkání, meningoencefalitidou a artritidou. Vzhledem k tomu, že mykoplazmata se často nacházejí v horních cestách dýchacích a genitálních cestách zdravých zvířat, je někdy obtížné určit jejich roli v patologiích horních cest dýchacích a genitourinárního systému. Mykoplazmata mohou způsobit sekundární infekce, když je imunitní systém narušen v důsledku faktorů, jako je neoplazie nebo použití imunosupresivních léků.

Během kolonizace se mykoplazmata přichytí na buňky sliznice hostitele. Postižení hlubokých tkání a klinické onemocnění se vyvinou v důsledku imunosuprese nebo narušení slizniční bariérové ​​funkce. K přenosu infekce dochází kontaktem s infikovanými zvířaty nebo kontaminovanými předměty. Odolnost vůči faktorům prostředí a schopnost přežít mimo tělo hostitele se u různých typů mykoplazmat liší. Mykoplazmata se nacházejí v horních cestách dýchacích téměř u všech psů přibližně u 25 % zdravých psů, mykoplazmata se nacházejí v průdušnici a plicích. Faktory predisponující k rozvoji mykoplazmatické pneumonie nejsou vždy zřejmé. Mezi klinické příznaky patří horečka, kašel, tachypnoe, letargie a snížená chuť k jídlu. Mykoplazmata jsou často detekována u psů s neplodností a hnisavou epididymitidou, stejně jako u zdravých psů, takže jejich role ve vývoji patologií reprodukčního systému je nejasná. V některých případech mohou infekce Mycoplasma spumans a M. edwardii způsobit polyartritidu u psů a v synoviální tekutině je obvykle detekováno velké množství neutrofilů. To může vést k nesprávné diagnóze imunitně podmíněné polyartritidy. Zvířata s mykoplazmatickou polyartritidou mají obvykle imunosupresi způsobenou neoplazií nebo použitím glukokortikoidů.

Klinické příznaky mykoplazmózy závisí na tom, který orgán je infekcí postižen, a také na přítomnosti doprovodných patologií. V případě oční infekce je častěji pozorován serózní nebo serózně-hnisavý výtok, spojivková hyperémie a v některých případech keratitida. Při postižení horních cest dýchacích je přítomen výtok z nosu a kýchání, někdy doprovázené zánětem spojivek. Mycoplasma pneumonie může způsobit horečku, tachypnoe a zvýšené zvuky dechu. Infekce močových cest jsou doprovázeny hematurií a strangurií. Mykoplazmatická artritida může způsobit horečku, bolesti kloubů a otoky kloubů a v některých případech lymfadenopatii.

Diagnóza mykoplazmózy se provádí na základě klinických příznaků, výsledků laboratorních a radiografických studií, bakteriologické kultivace a PCR.

Existují testovací systémy PCR, standardní i v reálném čase, které umožňují detekovat DNA mykoplazmat ve vzorcích od nemocných zvířat a také odlišit různé typy mykoplazmat. Naše laboratoř má testovací systémy PCR, které nám umožňují odlišit M. sinos a M. canis. Stejně jako v případě bakteriologické kultivace by měly být výsledky studie PCR interpretovány s přihlédnutím k výsledkům všech ostatních provedených studií a přítomnosti doprovodných patologických stavů, protože u zdravých zvířat je často pozorována kolonizace mykoplazmaty.

Testovaný analyt: biopsie tkáně (biopsie dělohy, varlat).

Metoda výzkumu: PCR v reálném čase.

Příprava pacienta: není vyžadováno.

indikace: purulentní epididymitida, endometritida, cervicitida jako součást komplexní diagnostiky.

Kontraindikace: neznámý.

Způsob výběru biomateriálu: biopsie orgánu

Předanalýza:

Postup:

• Proveďte chirurgické/pitevní řezání fragmentu tkáně (děloha, varle).
• Bioptický vzorek vložte do mikrozkumavky s transportním médiem a pevně ji uzavřete víčkem, dokud nezaklapne.
• Mikrozkumavku zmrazte ve svislé poloze na -17°C…-23°С.
• Podepište zkumavku s uvedením druhu zvířete a údajů o majiteli, vyplňte všechna pole formuláře doporučení.
• Skladování vzorků je 1 měsíc při -17°C…-23°C.
• Teplotní režim pro transport do laboratoře je –17°C. -23°С (červené balení).

Interpretace výsledku:

Výsledky studie obsahují informace pouze pro lékaře. Diagnóza se provádí na základě komplexního posouzení různých ukazatelů, dalších informací a závisí na diagnostických metodách.

Formát výsledku: kvalitativní metoda. Detekce nebo nedetekce DNA Mycoplasma canis v testovaném vzorku

1. S. Vaden, D. Knoll, F. Smith, L. Tilley. Kompletní průvodce laboratorními a instrumentálními studiemi psů a koček.
2. Infekční onemocnění psů a koček, čtvrté vydání, ISBN: 978-1-4160-6130-4 Copyright © 2012, 2006, 1998, 1990 Saunders, otisk Elsevier Inc.
3. Systematický přehled a metaanalýza vztahu mezi 4 druhy mykoplazmat a onemocněním dolních cest dýchacích u psů. Anisha Jambhekar, Elizabeth Robin 2, Kevin Le Boedek, PMID: 31297880 PMCID: PMC6766487 DOI: 10.1111/jvim.15568

Psí hemotropní mykoplazmata (do 90. let XNUMX. století známá jako Haemobartonella a Eperythrozoon species) jsou bakterie rodu Mycoplasma, které nemají buněčnou stěnu, přichycují se na membránu červených krvinek, čímž způsobují jejich poškození s pravděpodobným rozvojem hemolytické anémie.

U psů jsou v současnosti známy dva patogeny ze skupiny hemotropních mykoplazmat: Mycoplasma haemocanis (dříve Haemobartonella canis) a Candidatus Mycoplasma haematoparvum. Prevalence těchto patogenů v populacích psů různých zemí se výrazně liší, u některých je převaha jednoho druhu a u jiných opačná situace, nicméně celková nákaza psů může přesáhnout 10 %. Cesty přenosu hemotropních mykoplazmat u psů nebyly plně prozkoumány, ale byl experimentálně potvrzen přenos vektorem klíšťaty Rhipicephalus sanguineus, z matky na plod transplacentárně a také vstupem infikované krve do gastrointestinálního traktu. Psi ve stejné populaci žijící společně jsou často přenašeči, takže určitá role je přiřazena přenosovým cestám prostřednictvím agresivní interakce a péče o klouby. Důležitým zdrojem infekce může být krevní transfuze od infikovaného dárce.

Významný rozdíl mezi hemotropními mykoplazmaty u psů spočívá v tom, že extrémně zřídka způsobují klinické projevy onemocnění u zvířat se slezinou. Zpravidla jsou to psi po splenektomii, kteří mají klinický obraz akutní hemoplazmózy, provázené hemolytickou anémií. Za predisponující faktory k jejímu vzniku jsou považovány i imunosupresivní stavy včetně lymfoproliferativních onemocnění, chemoterapie a onemocnění sleziny, tyto příčiny jsou však v klinické praxi mnohem méně časté.

Klinické projevy u psů nejsou obecně tak výrazné jako u koček a mohou být reprezentovány bledostí sliznic (ikterus se vyvíjí méně často), letargií a nechutenstvím. Mezi hematologickými nálezy je středně těžká a těžká regenerační anémie, těžká polychromázie a lze také pozorovat velké množství Jollyho tělísek, což může naznačovat nepřítomnost sleziny u psa.

M. haemocanis je u psů bez klinických projevů hemoplazmózy téměř nemožné detekovat krevní mikroskopií, i když ani v tomto případě není vždy možné je zobrazit. Stejná omezení, která platí pro diagnostiku hemoplazmózy u koček, platí i pro psy: při expozici EDTA hemotropní mykoplazmata zaostávají za membránou erytrocytů maximálně hodinu (v průměru 30 minut), proto je nutné provést stěry z čerstvé krve , stejně jako kvalita zbarvení a přítomnost precipitátu výrazně ovlivňují vizualizaci parazitů, i když obecně je morfologie Mycoplasma haemocanis lépe rozpoznatelná díky Jejich charakteristikou je tvořit tyčovité struktury.

Termíny: 1 den (plus 1-2 dny pro regiony).

Testovaný analyt: plná žilní krev.

Metoda výzkumu: PCR v reálném čase.

Příprava pacienta: biomateriál je vybrán před použitím systémových léků.

• psi po splenektomii;
• psi s imunosupresí, zejména ti s anémií;
• potenciálního dárcovství krve.

Kontraindikace: neznámý.

Způsob výběru biomateriálu: venepunkce.

Předanalýza:

1. Proveďte postup odběru krve.
2. Po přidání biomateriálu do zkumavky s fialovým uzávěrem (EDTA) opatrně zkumavku 6-7krát obraťte, aby se materiál promíchal s antikoagulantem.
3. Zmrazte ve svislé poloze při -17°C…-23°C.
4. Označte kontejner svým celým jménem. majitele a jméno zvířete.
5. Vyplňte doporučující formulář s uvedením kódu klienta.
6. Skladovatelnost vzorku při -17°C. -23°C je dva týdny.
7. Teplotní režim pro transport do laboratoře -17°С…-23°С (červené balení)

MINIMÁLNÍ OBJEM KRVE PRO PROVÁDĚNÍ STUDIE JE 1 ML

Výklad: Výsledky studie obsahují informace výhradně pro lékaře. Diagnóza se provádí na základě komplexního posouzení různých ukazatelů, dalších informací a závisí na diagnostických metodách.

PCR diagnostika jako mnohem citlivější metoda dokáže detekovat přítomnost hemoplazmózy u psů, nicméně tento nález je třeba interpretovat s přihlédnutím ke klinickému obrazu a zvláštnostem průběhu hemoplazmózy u tohoto druhu zvířat. Při absenci anémie nebo jejího vzoru, který neodpovídá anémii charakteristické pro hemoplazmózu, je nutné přemýšlet o dalších důvodech rozvoje tohoto syndromu. Zároveň je vhodné otestovat rizikové psy (zejména ty, kteří podstupují splenektomii) na přítomnost tohoto patogenu v krvi, stejně jako dárce, protože krevní transfuze často doprovází operace k odstranění sleziny.

Formulář výsledku: kvalitativní metoda.

Detekce nebo nedetekce DNA Haemobartonella canis/Mycoplasma haemocanis v testovaném vzorku.

1. Infekční choroby psů a koček, 4. vydání, Craig E. Greene, DVM, MS, DACVIM, str. 310-319;
2. Infekční choroby psů a koček, Jane E. Sykes, str. 390-395.