Laboratorní diagnostika onemocnění jater u psů a koček – informace z veterinární kliniky Vita Rostov

onemocnění jater – poměrně častá patologie u domácích zvířat, někdy spojená nejen s infekčními chorobami, ale také s takovými důvody, jako je nedostatečné nebo nesprávné krmení, alergické a stresové faktory, které mají systémový účinek.

Játra se podílejí na řadě metabolických procesů probíhajících v těle zvířat i lidí. Laboratorní testy jaterních funkcí zahrnují několik aspektů týkajících se jejich role v metabolismu. Posouzením funkční kapacity jater se můžeme přiblížit k identifikaci etiologického faktoru, který poruchy způsobil.

Než tedy budeme mluvit o laboratorních metodách a jejich hodnocení, dotkněme se otázky „Jaké funkce plní játra u zvířat a lidí?

Onemocnění jater: Příznaky onemocnění jater, klinické příznaky, diagnostika hepatitidy, cirhózy, cholestázy, cholecystitidy a dalších onemocnění. Infekční onemocnění psů a koček s poškozením jater. Vše, co potřebuje praktický veterinář vědět, najdete zde!

ÚLOHA JATER V METABOLISMU

Metabolismus sacharidů

Játra jsou centrem metabolismu sacharidů v těle, jejich úlohou je udržovat normoglykémii, tedy fyziologickou koncentraci glukózy v krvi. Sacharidy se hromadí v játrech ve formě glykogenu a v případě potřeby se během glykogenolýzy hydrolyzují na glukózu. Pokud není dostatek dostupného glykogenu, glukóza se syntetizuje z aminokyselin (glukoneogeneze). Kromě toho se glukóza tvoří z glycerolu a meziproduktů vznikajících při glykolýze, jako je kyselina mléčná a pyrohroznová. Pokud je dieta nedostatečná v obsahu sacharidů, je koncentrace glukózy udržována díky konzumaci tělesných bílkovin. Tukové zásoby se spotřebovávají i během půstu, ale glukózu nelze syntetizovat z mastných kyselin. Navzdory tomu, že se tuky nepodílejí na udržování optimální hladiny glukózy, fungují pro tělo jako alternativní zdroj energie.

Glykogen – glykogenolýza – glukóza – normoglykémie

Aminokyseliny – glukoneogeneze – glukóza – normoglykémie

Klinický význam: Akutní nebo chronické onemocnění jater může být doprovázeno hypoglykémií

Metabolismus bílkovin

Játra jsou klíčovým místem metabolismu bílkovin. Aminokyseliny a proteiny absorbované ze střev nebo syntetizované v těle jsou dodávány do jater. Zde jsou aminokyseliny deaminovány a mohou být podle potřeby přeměněny na sacharidy nebo tuky. Deaminace se provádí pomocí alfa-ketokyseliny, která může být metabolizována pro energetické potřeby nebo využita pro syntézu monosacharidů a mastných kyselin. Játra jsou schopna syntetizovat aminokyseliny z produktů metabolismu sacharidů a tuků prostřednictvím aminace a transaminace. Příklady transaminace aminokyselin:

Alanin + alfa-ketoglutarát = pyruvát + glutamát

Aspartát + alfa-ketoglutarát = oxaloacetát + glutamát

Játra syntetizují mnoho proteinů, včetně albuminu a fibrinogenu, většinu alfa globulinů, některé beta globuliny, ceruloplasmin, feritin a další.

Metabolismus močoviny zahrnuje oxidační štěpení aminokyselin. Ammonium je nejjednodušší metabolit metabolismu aminokyselin. Gastrointestinální trakt a hlavně tlusté střevo je hlavním zdrojem aminů vstupujících do těla, protože právě tam se endogenní močovina působením bakteriální ureázy rozkládá na jednoduché sloučeniny obsahující dusík, především amonium. Ten vstupuje do portální žíly a je transportován do jater a prochází transformací:

2NH₃ + CO₂ + 3ATP + H₂O = močovina + 2 ADP = 4Pi + AMP + 2H

Klinický význam: Mohou být spojena akutní a chronická onemocnění jater

1. zvýšená aktivita aminotransferáz,
2. hypoalbuminémie,
3. hyperamonémie a
4. snížení močovinového dusíku v krvi.

Metabolismus tuků

Játra se jako prostředník podílejí na metabolismu lipidů: 1) syntéze triglyceridů, 2) oxidaci mastných kyselin a 3) syntéze cholesterolu, jeho akumulaci, sekreci a transportu.

Klinický význam: Akutní a chronická onemocnění jater může být doprovázena hypocholesterolemií. Úplná nebo částečná obstrukce žlučových cest může být doprovázena steatoreou.

Faktory srážení

Játra syntetizují plazmatické koagulační faktory I (fibrinogen), II (protrombin), V, VII, VIII, IX, X. Faktory II, VII, IX a X jsou závislé na vitaminu K. U onemocnění jater jsou nejdůležitější faktory s nejkratším poločasem – faktory VII a VIII.

Klinický význam: akutní a chronická onemocnění jater mohou být doprovázena 1) zvýšením protrombinového a parciálního tromboplastinového času; 2) koagulopatie.

Vylučování žluči

Žluč je mírně alkalická izotonická směs žlučových solí, žlučových pigmentů, fosfolipidů, cholesterolu, elektrolytů a vody. Žlučové kyseliny a žlučové soli jsou hlavní složkou žluči. Žlučové kyseliny se syntetizují z cholesterolu a v kombinaci s aminokyselinou (obvykle taurinem a glycinem) se přeměňují na soli. Vylučují se do žlučovodů a žlučníku, kde se nějakou dobu uchovávají. Poté se proudem žluči dostávají do tenkého střeva (při krmení). Žlučové soli emulgují krmné tuky, čímž výrazně usnadňují práci pankreatické lipázy. Reabsorpce žlučových solí v ileu usnadňuje návrat žlučových kyselin do jater pro reabsorpci, syntézu a sekreci do gastrointestinálního traktu.

Klinický významb: Obstrukce žlučových cest může být doprovázena žloutenkou a steatoreou.

Metabolismus porfyrinu

Porfyriny jsou meziprodukty biosyntézy hemu. Normálně se porfyriny přeměňují na část hemoglobinu schopnou transportovat kyslík, stejně jako myoglobin, cytochromy, katalázu a peroxidázu. U porfyrinů plní játra syntetické a vylučovací funkce.

Klinický význam: Akutní a chronická onemocnění jater může být provázena 1) hromaděním porfyrinů a porfyrickým syndromem (porfyrinové onemocnění), častěji však 2) zvýšením koncentrace bilirubinu a žloutenkou.

Výměna kovů

Játra jsou zásobárnou železa, které v nadměrném množství v krevním řečišti může být toxické (hemochromatóza). Množství železa v těle je z velké části dáno jeho vstřebáváním v horní části tenkého střeva. Železo se ukládá ve formě feritinu uvnitř buněk některých tkání, z nichž největší zásobní kapacitu má jaterní parenchym. Když játra již nejsou schopna ukládat železo, hromadí se ve formě hemosiderinu. Kromě železa obsahují játra měď jako nedílnou součást specifických proteinů, jako je cytochromoxidáza, mitochondriální monoaminooxidáza a ceruloplasmin. K mobilizaci mědi z hepatocytů dochází dvěma mechanismy: vazbou ceruloplasminu a sekrecí žluči.

Klinický význam: Cholestáza může být doprovázena zadržováním železa a mědi, což může způsobit poškození hepatocytů prostřednictvím apoptózy a vystavení volným kyslíkovým radikálům.

Výměna vitamínů

Játra hrají důležitou roli v metabolismu vitamínů. Žluč tedy podporuje vstřebávání vitamínů rozpustných v tucích (A, D, E, K) a játra samotná jsou zásobárnou vitamínů. Vitamíny rozpustné ve vodě jiné než vitamín B₁₂ (kobalamin), se snadno vstřebávají z tenkého střeva. Tyto vitamíny se používají především jako koenzymové prekurzory v metabolických procesech. Velké množství všech vitamínů rozpustných ve vodě, s výjimkou vitamínu C, se ukládá v játrech.

Klinický význam: Cholestáza může být doprovázena steatoreou a malabsorpcí vitamínů rozpustných v tucích.

Metabolismus xenobiotik (cizorodých látek)

Četné cizorodé sloučeniny, včetně léků, by zůstaly v těle neomezeně dlouho, pokud by nebyly biotransformovány v játrech. Játra jsou důležitým orgánem, jehož funkce určuje toxicitu léku nebo toxinu pro organismus jako celek. Klíčová úloha jater se vysvětluje tím, že 75-80 % průtoku krve játry tvoří krev proudící přímo z gastrointestinálního traktu a sleziny. Tato krev transportuje nejen živiny, ale také bakterie a bakteriální antigeny, léky a xenobiotika, která se vstřebávají ze střev.

Klinický význam: Akutní a chronická onemocnění jater mohou být doprovázeny hromaděním xenobiotik a také endogenních hormonů (například glukokortikoidů).

Imunitní kontrola

Retikuloendoteliální systém jater odstraňuje mikroby, endotoxiny, enterotoxiny a exotoxiny. Játra regulují homeostázu T buněk, indukují toleranci T buněk a udržují intrahepatální odpověď T buněk proti hepatotropním patogenům.

Klinický význam: Akutní a chronická onemocnění jater mohou být doprovázena bakteriémií a predispozicí k systémové infekci.

Tabulka 1. Vztah mezi klinickými pozorováními a patologií jater

• Akutní žaludek – zácpa, zánět, infekce, trombóza
• Acholické výkaly (bez žvýkaček). – obstrukce žlučových cest
• Anorexie/hubnutí – záněty, infekce, poruchy krmení, zvracení, průjem, poruchy metabolismu
• Ascites – portální hypertenze, retence sodíku (zpoždění) v ledvinách, hypoproteinémie
• Deprese, slabost – hypoglykémie, hepatoencefalopatie (amoniak, mastné kyseliny, merkaptany, alkalóza)
• Průjem – obstrukce žlučových cest, průvodní onemocnění střev, portální hypertenze
• Horečka – infekce, zánět, neoplazie
• hematurie – infekce, koagulopatie (onemocnění, při kterém je narušena srážlivost krve), kameny
• žloutenka – primární onemocnění jater a žlučových cest
• Melena (střevní krvácení) – masivní krvácení, záněty trávicího traktu, ulcerace
• Petechie – trombocytopenie, trombocytopatie
• Polyurie/polydipsie – renální dysfunkce, nedostatek draslíku, hyperadrenokorticismus
• Svědění – fotoaktivace žlučových solí
• Zvracení – centrální mechanismy (hepatotoxikóza), zánět, hypergastrinémie, ketonémie

LABORATORNÍ STUDIE JATERNÍCH ONEMOCNĚNÍ

Pokud má veterinární lékař podezření, že má zvíře onemocnění jater, musí být provedeny následující minimální testy:

1. kompletní krevní obraz, včetně počtu erythroitů, leukocytů a krevních destiček;
2. biochemický krevní test na následující ukazatele: elektrolyty, močovina, kreatinin, glukóza, cholesterol, albumin, globuliny, bilirubin, alaninaminotransferáza (ALT), aspartátaminotransferáza (AST), alkalická fosfatáza (ALP), gama-glutamyltranspeptidáza (GGT);
3. analýza moči;
4. flotační vyšetření stolice, mikroskopie nativního nátěru.

Pokud je nutné posoudit velikost orgánu, provede se rentgenový snímek dutiny břišní. V rámci diferenciální diagnostiky nebo k upřesnění diagnózy mohou být předepsány i další laboratorní a klinické testy.

1. Kompletní krevní obraz

Obecný krevní test bude užitečný pro posouzení závažnosti anémie, její formy (akutní, chronické) a také pomůže identifikovat zánětlivou reakci a trombocytopenii. Hematologie většinou odhalí pouze nespecifické změny jaterních onemocnění, jako je mikrocytární anémie, nebo normocytární, normochromní neregenerativní anémie. Abnormálně tvarované červené krvinky, např. schistocyty и leptocyt, lze detekovat v krevních nátěrech zvířat s jaterním selháním a dyslipidémií (obr. 1). Těžký leukocytóza и neutrofilie mohou být pozorovány u zvířat s bakteriální, virovou nebo granulomatózní hepatitidou, jaterní nekrózou nebo abscesem a jaterní neoplazií.

2. Biochemie krevního séra

Standardní chemické testy séra pomáhají identifikovat metabolické příčiny onemocnění, včetně onemocnění jater (zvýšení активности ALT, AST, alkalický fosfát, GGT a bilirubin; snížit sérové ​​koncentrace glukóza, bílkovina и cholesterolu), nemoc ledvin (zvýšení Množství močovina, kreatinin и fosfor), stejně jako některé endokrinní poruchy, jako je diabetes mellitus, hyper- a hypoadrenokorticismus. Zvýšený poměr močoviny a kreatininu (více než 50:1) může sekundárně indikovat gastrointestinální onemocnění, která obvykle doprovázejí onemocnění jater. Paraneoplastické změny (např. hyperkalcémie, hyperglobulinémie) spojené s jaterní nebo systémovou neoplazií (např. lymfom, extramedulární plazmocytom) lze také určit pomocí biochemické analýzy séra. Za tímto účelem se provádí studie krevního séra k posouzení poměru proteinových frakcí.

3. Analýza moči

Při určení velmi pomůže vyšetření moči hypostenurie (vylučování moči trvale nízké relativní hustoty, například s nízkou močovinou), hematurie (např. koagulopatie) a krystalurie (například biuráty amonné). Na hypoalbuminémiePro vyloučení ztráty bílkovin v důsledku nefropatií je nutné stanovit poměr bílkovin a kreatininu v moči. Pokud se u zvířete vyvinul ascites, pak by se odběr moči během cystocentézy měl přednostně provádět pod ultrazvukovou kontrolou.

4. Fekální analýza

Mikroskopie fekálního nátěru by měla být součástí každého screeningového testu, včetně podezření na onemocnění jater. Ačkoli většina parazitů a mikrobů primárně postihuje specifickou část gastrointestinálního traktu, někteří mohou způsobit patologii v celém traktu (např. Salmonella, Campylobacter, Pythium, Histoplasma), a také způsobit vážné patologie slinivky břišní, jater a žlučových cest.

Další diagnostické testy

Na základě výsledků získaných během počátečních studií mohou být předepsány další testy. K potvrzení nebo upřesnění diagnózy by měly být u zvířat provedeny jaterní funkční testy (např. protrombinový čas, přítomnost žlučových pigmentů). To je důležité zejména při podezření na jaterní cirhózu, která je zpravidla doprovázena mírným zvýšením aktivity jaterních enzymů (ALT, AST, alkalická fosfatáza, GGT).

• Koagulace. Játra nejen syntetizují koagulační faktory, ale podílejí se také na tvorbě faktorů srážení krve a produktů fibrinolýzy. K posouzení funkčního stavu jater se proto provádí analýza protrombinového času (PT). To se vždy provádí před provedením invazivních postupů, jako jsou biopsie jater. PT bude obecně vyšší u těžké akutní nekrózy jater nebo kolapsu parenchymu.

• Amonium v ​​krevní plazmě. Amoniak je vedlejším produktem metabolismu střevních bakterií. S krví putuje do jater, kde je dále metabolizován. Při těžkém onemocnění jater se amoniak hromadí v systémovém oběhu a při překročení prahových hodnot způsobuje hepatoencefalopatii. Pokud jsou výsledky tohoto testu nejednoznačné, mohou být plazmatické koncentrace amonia měřeny před a po podání chloridu amonného (100 mg/kg per os nebo per rectum). Krev se odebírá do speciálních vakuových zkumavek, umístí se na led a analýza musí být provedena do 20 minut po odběru krve.

• Sérové ​​žlučové kyseliny. Koncentrace žlučových kyselin v krevním séru se zvyšuje, pokud je narušena enterohepatální recirkulace. Vychytávání a sekundární sekrece žlučových kyselin je snížena u mnoha forem primárního onemocnění jater: infekcí, malignit a portosystémového zkratu. Detekce žlučových kyselin před nebo po krmení v koncentraci vyšší než 15 pmol/l u koček a 25 pmol/l u psů svědčí pro přítomnost patologického procesu v játrech.

• Analýza těžkých kovů. Normální koncentrace mědi v játrech se u psů pohybují v rozmezí 200-400 pg/g suché hmotnosti jater. Onemocnění jater doprovázené cholestatickými procesy vedou ke zvýšení koncentrace těžkých kovů (Cu 2+, Fe 2+). Zejména nadměrné množství mědi vede k destrukci hepatocytů, především v důsledku hromadění volných radikálů, peroxidace lipidů a apoptózy. Analýza bioptického materiálu na obsah mědi může být provedena v Centru diagnostiky a prevence chorob zvířat.

vizuální výzkum

Diagnóza onemocnění jater by neměla být založena pouze na laboratorních testech. Doporučujeme provést rentgenový snímek dutiny břišní a v případě negativního nebo pochybného výsledku provést ultrazvukové vyšetření. Tyto manipulace umožňují posoudit velikost orgánu, jeho tvar, hustotu a také posoudit umístění a stav jiných orgánů (ledviny, slezina, slinivka břišní)

V některých případech je k potvrzení diagnózy nutná biopsie tkáně.

ZÁVĚR

Složitost funkcí jater (tabulka 1) a rozmanitost onemocnění tohoto orgánu u psů a koček jsou takové, že veterinární lékař není schopen stanovit diagnózu na základě jediné analýzy. Svědomitý lékař při posuzování funkčního stavu jater použije integrovaný přístup, přičemž si dá pozor na mnohá úskalí. Zejména nelze vyloučit možnost, že normální výsledky testů nevylučují vždy onemocnění jater.

Zdraví pro vás a vaše malé přátele!
Ph.D. A.G. Ključnikov

informace byly použity při přípravě materiálu
z časopisu Veterinary Focus Vol 20 No3 / 2010

Laboratorní testy na onemocnění jater
Robert Washabau,
VMD, PhD, Dipl. ACVIM
Vysoká škola veterinárního lékařství
University of Minnesota St Paul,
Minnesota, USA