PCR pro plazy

Problém, který přitahuje pozornost soukromých a veřejných zdravotnických lékařů i široké veřejnosti, je riziko salmonelózy u lidí z plazů a jiných nižších obratlovců.

Samotní plazi trpí salmonelózou poměrně zřídka, ale každý klinicky zdravý plaz je potenciálně schopen vylučovat salmonelu ze střev, takže bakterie rychle kontaminují kůži zvířete a životní prostředí.

Člověk se může nakazit buď kontaktem s plazem nebo při čištění terária, někdy i bez přímého kontaktu se zvířetem nebo jeho mikroprostředím. To je ve skutečnosti problém.

Hlavním zdrojem tohoto onemocnění jsou želvy červenoušské a želvy boxerské. Nedávno do tohoto seznamu přibyli leguáni zelení. V současné době jsou leguáni nejoblíbenějším druhem plazů chovaných v domácnostech, kteří převyšují prodej želv červenouchých a želv, jiných ještěrek a hadů. Není pochyb o tom, že se člověk může nakazit od jakéhokoli plaza, ale popularita leguánů z nich dělá hlavní zdroj této nemoci. V tomto ohledu se velmi aktuální stávají otázky zlepšování zdravotního stavu komerčních šarží zvířat, prevence přenosu salmonel u plazů a prevence infekce u lidí, jakož i vývoj rychlých a citlivých diagnostických metod.

Riziko nákazy člověka salmonelózou při chovu plazů se odhaduje na 2 %. Zde je potřeba určité objasnění.

Jednak pro infekci je nutné dostat minimální infekční dávku, tzn. určitý počet mikrobiálních buněk. Většina ještěrek vylučuje salmonelu pouze periodicky a v mírném množství. Podle toho se člověk může nakazit pouze velmi blízkým kontaktem s ještěrkou (pokud ji neustále drží v náručí, nechává ji sedět u stolu, líbá ji atd.), nebo pokud je zcela zanedbávána osobní hygiena. Podle různých zdrojů se salmonela vyskytuje u 36–77 % ještěrek. Přeprava je typická spíše pro mladá zvířata. Čím více salmonel ještěrka produkuje, tím vyšší je riziko infekce. Proto jsou ještěři s klinickým onemocněním v tomto smyslu mnohem nebezpečnější než zdraví přenašeči.

Za druhé, infekce závisí na virulenci a patogenitě kmene Salmonella, který plaz vylučuje, a na vnímavosti lidí k němu. Je známo, že plazi mohou vylučovat vysoce virulentní kmeny, které jsou vysoce patogenní pro člověka. Virulence některých z nich výrazně převyšuje virulenci kmenů izolovaných z ptáků a savců. Mezi více než 200 hlášenými sérotypy Salmonella izolovanými z plazů však ne všechny spadají do této skupiny. U leguánů zelených jsou nejčastěji typizovanými druhy S.marina a S.poona. Oba tyto sérotypy jsou pro člověka patogenní, ale jedná se o vzácné kmeny. Podle výzkumu bylo za posledních 10 let identifikováno 18 případů nákazy člověka salmonelózou od plazů.

Lidská vnímavost k virulentním kmenům Salmonella také není konstantní a závisí na různých důvodech. Rizikovou skupinou jsou především děti do 10 měsíců věku a pacienti trpící syndromem imunodeficience. Mezi „normálními“ pacienty jsou nejnáchylnější děti do 4 let a dospělí s imunosupresí, dysbiózou a souběžnými onemocněními.

Ve většině případů se salmonelóza u lidí při infekci kmeny plazů projevuje střevní formou střední závažnosti nebo septickou formou (u dětí). Připomeňme, že inkubační doba salmonelózy se pohybuje od šesti hodin do tří dnů. Onemocnění začíná vysokou horečkou (nad 39 stupňů), která ve vlnách trvá až pět i více dní. Na počátku onemocnění je zaznamenáno opakované zvracení, hojná, vodnatá, páchnoucí stolice (více než desetkrát denně), trvající až sedm i více dní. Může dojít ke zvětšení jater a sleziny, ichterické kůže a skléry. Poté se ve dnech 2-3 objeví herpetická vyrážka a od 6.-7 dnů je vyrážka lokalizována hlavně na žaludku.

Meningitida je často pozorována u dětí. Manifestní salmonelóza často končí chronickým bakteriálním nosičstvím. Je jasné, že salmonelóza patří mezi nebezpečné nákazy a vyžaduje přísná karanténní opatření, ale v různých zemích je přístup k prevenci přenosu salmonel a léčbě nemocných zvířat a lidí poněkud odlišný.

Salmonella není běžnou flórou divokých ještěrů a k jejich nákaze může dojít přímo na množírnách ještěrek. Pak již infikovaní plazi končí na našem trhu. Skutečnost, že mnoho mladých leguánů, kteří se dostanou do našich obchodů se zvířaty, má zjevnou salmonelózu naznačuje, že stres a imunosuprese během přepravy a držení komerčních šarží hrají velkou roli v patogenezi tohoto onemocnění.

V zajetí lze přenos salmonel považovat za normu v tom smyslu, že se vyskytuje u většiny přenašečů, zpravidla zůstává klinicky zdravý a nepředstavuje hrozbu pro jiné druhy plazů.

Vnímavější ptáci, savci a lidé se s větší pravděpodobností nakazí, a to od jakéhokoli klinicky zdravého plaza v přítomnosti určitých faktorů vedoucích k infekci. Salmonelózou mohou trpět i samotní plazi, ale manifestní onemocnění se vyskytuje především u mladých zvířat, která jsou přepravována nebo držena ve velkých komerčních zásilkách.

Udržování želv a případně ještěrek při zvýšených teplotách nebo nedostatku tekutin podporuje aktivnější uvolňování Salmonelly z latentních přenašečů a někdy vyvolává manifestní onemocnění.

Manifestní salmonelóza u plazů se léčí jako každé jiné onemocnění bakteriální etiologie, tzn. pomocí systémové antibiotické terapie a lokálních antiseptických roztoků a mastí. S ohledem na dobře známou rezistenci (včetně zkřížené rezistence) Salmonelly na mnoho léků by léčba měla začít účinným Baytrilem, ale v případě potřeby ji upravit v souladu s údaji z antibiogramu. Kromě antibiotik se používají specifické bakteriofágy a nespecifické imunostimulanty.

U nás se při izolaci salmonel z jakýchkoliv plazů, klinicky zdravých i nemocných, zavádí karanténa a léčebná a preventivní opatření a sankce se ruší až po negativním výsledku kontrolních bakteriologických vzorků. Okamžitě zde vyvstávají otázky.

Za prvé, nízká citlivost bakteriologických metod nám neumožňuje stoprocentně zaručit, že vyšetřovaná zvířata jsou bez salmonel. To platí zejména pro kontrolní studie, které po antibiotické terapii téměř vždy dopadnou negativně.

Za druhé, izolované kmeny jsou špatně typizovány, což často znemožňuje stanovení sérotypu Salmonella, který je důležitý pro prognózu a hodnocení zoonotického rizika.

Za třetí, léčba přenašečů není oprávněná a je nebezpečná z mnoha důvodů. Pokud se například v odběru zoologické zahrady vyskytuje salmonela v průměru u poloviny populace plazů, jak lze v této situaci zabránit přenosu, když ani negativní kontrolní testy nic nezaručí?

Západní země již dlouho opustily léčbu klinicky zdravých nosičů. Praxe ukazuje, že v zoologických zahradách, kde chov zvířat obecně splňuje hygienické požadavky, je infekce personálu extrémně vzácná, a to i přes vysoké procento přepravy u plazů. Naopak v domácích podmínkách, kde má chov zvířat často mnoho chyb (zejména s ohledem na nedodržování vlhkosti v teráriích a osobní hygieny), pravděpodobnost nákazy stoupá.

Doporučení pro prevenci infekce salmonelou od plazů:

1. Plazi pro domácí mazlíčky by se měli držet mimo kuchyně a jiné prostory pro přípravu jídla
2. Plazi by měli žít ve speciálně vybavených teráriích a neměli by se volně pohybovat po domě
3. Kuchyňské dřezy by se neměly používat k mytí plazů, jejich náčiní, terárií nebo vybavení. Pokud se pro tyto účely používá vana, musí být po provedení manipulací dezinfikována prostředky obsahujícími chlór.
4. Po kontaktu s plazy a jejich teráriem byste si měli důkladně umýt ruce mýdlem a vodou.
5. Osoby se zvýšeným rizikem infekce nebo osoby, u kterých by se potenciálně mohly vyvinout závažné komplikace infekce (děti do 5 let a jedinci s oslabenou imunitou), by se měli vyhýbat kontaktu s plazy a neměli by je chovat jako domácí mazlíčky.
6. Rodiny, které čekají miminko, by měly odstranit plazy z domova ještě před porodem.
7. Prodejci zverimexu a veterináři musí majitelům a potenciálním kupcům plazů poskytnout informace o riziku nákazy salmonelou od nich.
8. Plazi by neměli být chováni v dětských centrech a předškolních skupinách.

V posledních desetiletích vzrůstá zájem o zdraví plazů, zejména infekční nemoci, které mohou významně ovlivnit pohodu plazů.

PCR diagnostika se stala nedílnou pomůckou veterinární praxe, která umožňuje rychle a přesně detekovat nebezpečné infekce, jako je salmonelóza, mykózy, mykoplazmózy a nemoci způsobené mykobakteriemi. Infekční agens mohou být hlavním viníkem onemocnění a úmrtnosti plazů a pro úspěšnou léčbu je rozhodující včasná diagnóza.

SALMONELÓZA

Infekční agens jsou hlavní příčinou morbidity a mortality u plazů. Mnohé z těchto nemocí lze úspěšně léčit, pokud jsou rozpoznány včas. Tato skupina onemocnění je téměř vždy důsledkem imunosuprese u plazů, často spojené se stresem ze zajetí.

Klinicky zdraví plazi mohou být často přenašeči bakterií, zejména salmonely, kterou zvířata mohou vylučovat ze střev a kontaminovat jejich kůži a životní prostředí bakteriemi. Zoonotická povaha těchto komenzálních organismů musí být zohledněna při manipulaci s plazy nebo při léčbě plazů

Salmonella je rod gramnegativních tyčinek z čeledi Enterobacteriacea, která je součástí normální flóry gastrointestinálního traktu volně žijících i chovaných plazů.

Rod Salmonella zahrnuje dva druhy: Salmonella enterica a Salmonella bongori. Oba druhy Salmonella, jejich poddruhy a sérovary lze nalézt u plazů. Výjimky mohou zahrnovat některé sérovary přizpůsobené ptačím nebo savčím hostitelům. Salmonelu nejčastěji najdeme u hadů, následují ještěrky, želvy a krokodýli.

Hlavní cesty přenosu

Plazi se mohou nakazit salmonelózou fekálně-orální cestou, požitím kontaminované potravy a také transovariální a kloakální kontaminací vajec. V druhém případě jsou mláďata ihned po vylíhnutí již přenašečem salmonely, pokud byla nakažena samice, která snůšku snesla. Velkou roli v patogenezi salmonelózy u plazů hraje špatné krmení, nepříznivé životní podmínky, přítomnost chronických onemocnění a také stres spojený s přepravou nebo držením zvířat.

Klinické příznaky

Klinické příznaky spojené se salmonelózou zahrnují především gastrointestinální léze, ale mohou také zahrnovat horečku, poruchy centrálního nervového systému, oběhové problémy, respirační a další příznaky.

Salmonella se často vyskytuje v dutině ústní, distálním střevě a kloace zdravých plazů bez významné invaze a zánětu sliznice, sérokonverze a klinických příznaků, které jsou často pozorovány u savců a ptáků.

Prevence

Účinné metody prevence k prevenci infekce plazů salmonelózou nebyly vyvinuty a v mnoha zemích již dávno opustily léčbu klinicky zdravých plazů přenášejících salmonelózu.

MYKÓZY

Existuje mnoho klinických a diagnostických problémů, které ztěžují včasnou a přesnou diagnostiku plísňových onemocnění u plazů. Mnoho druhů hub běžně obývá kůži a vnitřní orgány plazů, což může bránit přesné identifikaci houbového patogenu. Ze střev a trusu zdravých plazů byly izolovány houby Aspergillus, Penicillium, Basidiobolus, Fusarium, Mucor a mnoho dalších. To je třeba vzít v úvahu při izolaci jakéhokoli organismu v kultuře a ještě více při použití citlivých molekulárních metod.

Aspergilóza je onemocnění způsobené patogenními houbami rodu Aspergillus. Tyto houby jsou všudypřítomné a jsou to saprofyty s hojnou tvorbou spor. Jejich spory lze nalézt v půdě, vodě, vzduchu a rozkládající se vegetaci.

Kryptokokóza je onemocnění způsobené všudypřítomnými kvasinkami Cryptococcus neoformans a C. gatti, které se u mnoha druhů zvířat typicky projevuje plísňovou pneumonií, někdy se šíří do centrálního nervového systému.

Je známo, že jiné druhy Cryptococcus, jako je C. laurentii a C. albidus, někdy způsobují infekci u imunokompromitovaných lidí. Kryptokokóza byla hlášena u východního vodního skinka a zelené anakondy. Anakonda vykazovala neurologické příznaky i klasickou granulomatózní kryptokokovou pneumonii a meningoencefalitidu. Naproti tomu skink vykazoval malý, diskrétní otok kůže na zádech. Kryptokokóza je však u plazů stále vzácně diagnostikovaným onemocněním.

Klinické příznaky

Diagnostika systémových mykóz u plazů je také náročná, protože jsou často pomalé a klinicky asymptomatické, doprovázené pouze nespecifickými klinickými příznaky.

Nechutenství, letargie a progresivní slabost svědčí pouze pro nemocného plaza. Přítomnost dalších příznaků, jako je dušnost, regurgitace, průjem, hematochezie nebo dyschezie nebo neurologické abnormality, odrážejí specifickou systémovou poruchu, ale neobjasňují příčinu.

Plíseň je vzácná, ale pokud je přítomna, může vést k výskytu plísňových prvků v nátěru periferní krve. Diagnóza antemortem často vyžaduje rozsáhlé diagnostické postupy, včetně zobrazování, minimálně invazivních chirurgických technik, endoskopie nebo explorativní chirurgie s biopsií.

Hlavní cesty přenosu

Téměř ve všech ohniscích nebo jednotlivých případech mykózy plazů byly jako potenciální predisponující faktory identifikovány špatné chovatelské postupy, špatná hygiena, přeplněnost, stresující postupy nebo mechanické poruchy topného systému. Když je u plaza diagnostikována atletická noha, musí být každý z těchto faktorů pečlivě posouzen. Nakonec je třeba poznamenat, že původci mykózy u plazů jsou často odlišní od těch, kteří způsobují mykózy u jiných obratlovců a často jde o vzácné houby.

MYKOPLAZMÓZA

Bakterie patřící do rodu Mycoplasma jsou malé gramnegativní mikroorganismy, které nemají buněčnou stěnu. První mykoplazma izolovaná z plaza byla Mycoplasma testudinis, která byla odebrána z kloaky řecké želvy. Od té doby byly u plazů objeveny další druhy mykoplazmat (M. crocodyli, M. alligatoris, M. agassizii a některá další bezejmenná mykoplazmata).

Mykoplazma je známou příčinou rýmy a onemocnění horních cest dýchacích u želv, onemocnění průdušnice a plic u krajt barmských a polyserozitidy u krokodýlů. U amerických aligátorů způsobuje mykoplazmóza těžké systémové onemocnění a často smrt.

Hlavní cesty přenosu

Přímý kontakt (např. námluvy, rvačky) mezi zvířaty je nejpravděpodobnější cestou přenosu mykoplazmat a dynamiku onemocnění určuje sociální chování různých druhů plazů.

Klinické příznaky

Klinické příznaky u zvířat infikovaných Mycoplasma sp. zahrnují jednostranný nebo bilaterální serózní nebo mukopurulentní výtok z nosu, epiforu, oční edém a konjunktivitidu.

Kromě toho může mykoplazma způsobit letargii, dehydrataci, anorexii a kachexii, které mohou být smrtelné. Podstatným rysem mykoplazmatických infekcí je však skutečnost, že mohou v těle přetrvávat, aniž by způsobovaly jakékoli příznaky.

Často se onemocnění projevuje pouze v přítomnosti dalších mikroorganismů a faktorů prostředí v kombinaci s genetickými vlastnostmi a imunitními reakcemi hostitele.

MYKOBAKTERIE

Mykobakterie jsou intracelulární, acidorezistentní, aerobní (nebo v některých případech mikroaerofilní), nesporotvorné, nepohyblivé, pleomorfní, vysoce odolné vůči životnímu prostředí, pomalu rostoucí, tyčinkovité, grampozitivní bakterie.

Mykobakterie jsou v životním prostředí všudypřítomné. Potenciálně patogenní druhy u pacientů s plazy zahrnují Mycobacterium ulcerans, M. chelonae, M. haemophilum a M. marinum.

Klinické příznaky

Ačkoli jsou mykobakterie obvykle izolovány z kožních lézí, mohou také způsobit systémové onemocnění doprovázené nespecifickými příznaky, jako je anorexie, letargie a vyhublost. Ještěrky, hadi a krokodýli často vytvářejí malé výrůstky na jejich vnitřních orgánech. Mykobakteriální léze se pohybují od izolovaných granulomů po difúzní histiocytární infiltráty a někdy se objevují jako heterofilní granulomy

U plazů, zejména želv, se někdy vyskytuje akutní mykobakteriální septikémie, projevující se především systémovou fibrinocelulární trombózou.

diagnostika

Kyselinostálé organismy jsou snadno identifikovány v kožních seškrabech nebo tkáňových biopsiích. Ziehl-Neelsenovo barvení se používá na tkáňových vzorcích k identifikaci acidorezistentních bacilů a PCR může identifikovat mykobakteria na úrovni komplexu.

V retrospektivní studii zahrnující vzorky tkání od 90 plazů byly mykobakterie detekovány v 15,6 % případů barvením CN a 25,6 % pomocí PCR.

Omezený počet zpráv o onemocnění Mycobacterium u plazů může být způsoben nízkou skutečnou prevalencí. Je také možné, že případy zůstanou nediagnostikovány kvůli omezenému sledování veterináři a patology. Zdá se však, že se toto onemocnění projevuje jako chronické vysilující onemocnění, ale existují i ​​příklady jeho akutního projevu.

KRYPTOSPORIDIÓZA

Kryptosporidióza je protozoální onemocnění způsobené kokcidiemi z čeledi Cryptosporidiidae, rod Cryptosporidium, s akutním, subakutním nebo chronickým průběhem, charakterizované narušením žaludku, tenkého střeva a uvolněním sporulovaných oocyst.

Cryptosporidium bylo izolováno z více než 170 živočišných druhů. U plazů bylo onemocnění popsáno u více než 80 druhů, včetně 40 druhů hadů, 16 druhů ještěrek, 6 druhů želv a 1 druhu krokodýlů. Dvě hlavní oblasti, které Cryptosporidium ovlivňuje, jsou žaludek a tenké střevo.

Klinické příznaky

Když je žaludek infikován, jsou pozorovány příznaky, jako je zvracení a ztráta hmotnosti. V oblasti žaludku se navíc často nachází tvrdá boule. Při infekci tenkého střeva se může objevit průjem, hubnutí a zpomalení růstu.

U gekonů leopardů a tlustoocasých je infekce Cryptosporidium v ​​anglicky psané literatuře označována jako „stick tail“, což je běžný termín používaný k označení náhlého úbytku hmotnosti u takových gekonů. Zároveň mají velmi tenký ocas, který je ve skutečnosti jen kůží na kosti.

Kryptosporidiózu často provází průjmy, špatná chuť k jídlu, nutnost schovávat se a trávit čas v nejchladnějších částech výběhu. Často postihuje více než jednoho gekona na klec a může ovlivnit více klecí ve sbírce.

Postižení hadi nejsou schopni strávit potravu a obvykle zvracejí (technicky vyvracejí) nestrávené jídlo tři až pět dní po jídle. Pokud se neléčí, postižení hadi a ještěrky obvykle zemřou hlady, protože nejsou schopni správně strávit potravu.

Hlavní cesty přenosu

Hlavní druhy způsobující infekci u domácích plazů jsou C. serpentis, C. varanii a C. muris. První dva jsou specifické pro hady, respektive ještěrky, druhý druh také napadá želvy.

Hadi a ještěrky žijící v neoptimálních podmínkách ustájení, špatné hygieně, zmeškaných nebo nedostatečných karanténních obdobích a sběrech, které vedou k mnoha novým zvířatům, jsou vystaveni většímu riziku nákazy kryptosporidiózou.

diagnostika

Cryptosporidium, které postihuje tenké střevo, lze diagnostikovat ze vzorku stolice nebo kloakálního výtěru, který je odeslán do laboratoře k analýze kryptosporidiové DNA pomocí PCR. U druhů, které napadají žaludek, se provádí výplach žaludku nebo biopsie žaludku pro analýzu PCR

❗️V současné době neprovádíme PCR testování na kryptosporidiózu u plazů, ale pokud máte zvířata s podobnými příznaky, žádáme vás o pomoc při vývoji testovacího systému vhodného pro plazy – zašlete cytologické brýle s detekovanými oocystami, výkaly, rektální výplachy a biopsie postižené oblasti vnitřních orgánů.