Salmonelóza ptáků / Články s veterinární tematikou

Informujeme, že pro zjednodušení pochopení formy uvolňování práškových produktů NITA-FARM byly změněny názvy některých přípravků (WS – prášek rozpustný ve vodě, Feed – termostabilní krmné granule):

• Amoxigard WS (místo Amoxigard Feed)
• Doxilox WS (místo Doxilox Feed)

Autoři článku:

Balyshev A. V., kandidát biologických věd, vedoucí vědecký pracovník Všeruského výzkumného ústavu základní a aplikované parazitologie zvířat a rostlin pojmenovaný po K. I. Scriabin

Abramov S. V., kandidát veterinárních věd, vedoucí vědecký pracovník Všeruského výzkumného ústavu parazitologie pojmenovaného po K. I. Skrjabinovi

Kashkovskaya L. M., kandidátka veterinárních věd, vedoucí výzkumná pracovnice společnosti NITA-FARM Company

Šafářová M. I., kandidátka chemických věd, vedoucí výzkumná pracovnice skupiny pro vývoj produktů společnosti NITA-FARM

Bakteriózy (kolibacilóza, salmonelóza, stafylokokové a streptokokové infekce) zaujímají jedno z předních míst v patologii drůbeže. Jejich přítomnost na farmě vede k masivní úhynu hospodářských zvířat (až 70 %) v akutním nebo subakutním průběhu onemocnění. Chronické, pomalé infekce vedou k nerovnoměrnému nebo nízkému přírůstku tělesné hmotnosti u brojlerů, nízké konverzi krmiva, zvýšené citlivosti na stres, snížení produkce vajec a líhnivosti kuřat, zhoršení biologických vlastností embryí a poklesu postvakcinační antivirové imunity.

Je známo, že boj proti bakteriálním infekcím by měl být založen na souboru opatření: zootechnických, veterinárních a hygienických, protiepizootických a chemoterapeutických. Vzhledem k obtížné epizootické situaci na drůbežích farmách ohledně infekční patologie mají chemoterapeutika včetně antibiotik velký význam a odmítnutí jejich použití v produkčních podmínkách je v současné době nemožné [12]. Na druhou stranu dlouhá historie používání antibiotik ve veterinární medicíně a medicíně vedla k dalšímu problému – rozvoji rezistence patogenů k řadě z nich. To platí také pro cefalosporinové léky a fluorochinolony (zejména enrofloxacin), které jsou široce používány v chovu drůbeže. Proto je velmi důležité hledat prostředky, které jsou účinné proti širokému spektru bakteriálních kmenů, které ztratily citlivost na léky, které se v drůbežářství používají již dlouhou dobu.

Praxe ukazuje, že nejúčinnější jsou komplexní léky na bázi vysoce aktivních moderních látek, jejichž kombinace poskytuje synergický efekt a široké spektrum mikroflóry citlivé na lék [1, 4, 6].

Účelem této práce je zhodnotit terapeutickou účinnost nového antibakteriálního léku Amoxigard WS od tuzemské společnosti NITA-PHARM.

Amoxigard WS je širokospektrální antibiotikum na bázi amoxicilinu, chráněné kyselinou klavulanovou, ve formě prášku k perorálnímu podání. Lék je předepsán k léčbě pacientů s bakteriálními infekcemi u prasat a drůbeže.

Materiály a metody

Experiment byl proveden ve dvou fázích. V první fázi byly farmakokinetické parametry Amoxigardu WS stanoveny na 18 kuřatech křížence Smena-7 ve věku 30 – 32 dnů o hmotnosti 1,5 – 1,7 kg. Ptáci účastnící se experimentu byli chováni ve standardních farmářských podmínkách, předtím jim nebyla podávána žádná chemoterapeutika a byli klinicky zdraví. Pro přesné dávkování Amoxigardu WS byla všechna kuřata předem zvážena a byla vypočtena individuální dávka. Léčivo bylo kuřatům podáváno jednorázově perorálně v dávce 40 mg na 1 kg tělesné hmotnosti, což odpovídá 20 mg trihydrátu amoxicilinu a 5 mg kyseliny klavulanové na 1 kg tělesné hmotnosti. Vzorky krve byly odebrány před (0 hodin) a po aplikaci léku, o 10 hodin později; 15; 30 minut a 1; 1,5; 2; 4; 6; 8; 12 hodin. Obsah amoxicilinu a kyseliny klavulanové v krevním séru ptáků byl stanoven vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s tandemovou hmotnostní spektrometrickou detekcí (HPLC-MS/MS).

Ve druhé fázi byla hodnocena terapeutická účinnost Amoxigardu WS na brojlerech ve věku 14–21 dní, křížence Ross 308, s diagnózou salmonelózy na jedné z drůbežích farem v Moskevské oblasti. Na principu analogů byly z nemocných ptáků vytvořeny experimentální a kontrolní skupiny po 50 kusech.

Diagnóza byla stanovena na základě klinických příznaků, patologických a mikrobiologických studií s přihlédnutím k epizootické situaci na farmě. Bakteriologické testování zahrnovalo mikroskopii krevních nátěrů a parenchymálních orgánů, izolaci čisté kultury a biotest ke stanovení virulence patogenu. Studium morfologických a kulturních vlastností a identifikace izolovaných mikroorganismů byly prováděny metodami obecně akceptovanými v mikrobiologii [3, 11].

V experimentální skupině byl Amoxigard WS použit jako specifická terapie perorálně skupinovým způsobem po dobu 3–5 dnů (v závislosti na dynamice rekonvalescence) s pitnou vodou v dávce 4 g na 100 kg hmotnosti ptáka. Léčivý roztok byl připraven v množství 30 g léčiva na 100 litrů vody v objemu vypočteném pro spotřebu ptáky během dne. Kuřata v kontrolní skupině byla léčena obdobným importovaným lékem dle návodu (perorálně s pitnou vodou v denní dávce 4 g na 100 kg ž.hm. po dobu 3 až 5 dnů v závislosti na dynamice rekonvalescence). Každý den byly připravovány nové roztoky léků.

Pták byl během experimentu pozorován po dobu 7 dnů. Její tělesná teplota byla měřena selektivně ve skupinách před léčbou (1. den experimentu) a 7. den experimentu. Funkční stav těla kuřat byl hodnocen pomocí hematologických parametrů. Za tímto účelem byly vzorky krve odebírány ráno nalačno 1. a 7. den experimentu (před zahájením léčby a po 7 dnech). Pro obecnou klinickou analýzu byly do zkumavek s K3EDTA odebrány objemy krve 3,5–3 ml. Při výpočtu leukocytárního vzorce byly krevní nátěry barveny podle Romanovského-Giemsy pomocí soupravy pro fixaci a barvení přípravků pro hematologické a cytologické studie Haemocrafix (Rusko). Obarvené šmouhy byly pozorovány pod trinokulárním digitálním mikroskopem při 1000násobném zvětšení s imerzí.

Účinnost léčby byla hodnocena změnami v klinickém stavu ptáka, dobou zotavení, přítomností nebo nepřítomností úhynu v experimentální a kontrolní skupině, jakož i poměrem uzdravených a nemocných jedinců, vyjádřený v procentech. Pták, který neměl 7. den experimentu žádné klinické příznaky onemocnění a měl hematologické parametry v rámci normativních hodnot, byl považován za zdravého.

Pro všechna data byly vypočteny průměry a standardní chyba průměru a uvedeny v tabulkách.

Výsledky výzkumu a diskuse

Údaje z farmakokinetické studie přípravku Amoxigard WS ukázaly, že obě složky léčiva se vstřebávají z gastrointestinálního traktu do krve během 0,5 – 1,0 hodiny a poté se také rychle distribuují do tkání a zadržují se v nich po dobu nejméně 12 hodin, čímž poskytují baktericidní a terapeutický účinek. Četné experimenty farmakokinetiky a účinnosti léků na bázi amoxicilinu a kyseliny klavulanové potvrzují výsledky této studie [2, 5]. Jiní autoři potvrzují vysokou antimikrobiální aktivitu β-laktamů proti izolátům terénních kmenů stafylokoků [7, 10].

Před zahájením léčebných opatření byl zaznamenán jasný klinický obraz salmonelózy u ptáků obou skupin: serózně-hnisavá konjunktivitida; nejistá chůze; kuřata více seděla a pohybovala se s obtížemi; mukopurulentní výtok z nosu, zvýšená tělesná teplota (42,65±0,30 0C v kontrolní skupině a 42,49±0,18 0C v experimentální skupině); průjem. U některých jedinců byl pozorován zápal plic, dýchací potíže a sípání. Kuřata také vykazovala sníženou chuť k jídlu a zpomalený růst a vývoj.

Při pitvách uhynulých ptáků byla zjištěna nekróza sliznice céka s fibrinózními usazeninami na jeho povrchu. Sliznice žlučníku je oteklá, hyperemická, žlučník je vyplněn tmavě olivově zbarvenou žlučí smíchanou s fibrinem a hlenem. V hrudní dutině byl zaznamenán serózní výpotek smíchaný s fibrinovými vločkami. V plicích mají ohniska zhutnění šedo-červenou barvu. Na základě výsledků bakteriologické studie vnitřních orgánů uhynulých kuřat byly na farmě izolovány kultury S. enteritidis. V některých případech byly z patologického materiálu izolovány kromě Salmonelly i kultury Proteus vulgaris a Sterpococcus pyogenes.

Studie morfologického obrazu krve odhalila leukocytózu a zvýšení ESR v důsledku zvýšení množství globulinů, fibrinogenu a mukopolysacharidů, což je charakteristické pro zánětlivé procesy. Navíc byla pozorována relativní erytrocytóza na pozadí dehydratace (tabulka 1). Většina biochemických parametrů byla v mezích normy; byl zaznamenán pouze nárůst celkové bílkoviny, což také potvrdilo přítomnost zánětlivých procesů v těle ptáka (tabulka 2).

Morfologické krevní parametry brojlerových kuřat (n=5)

Salmonelóza je infekční onemocnění zvířat i lidí. Ze zvířat a ptáků postihuje salmonelóza především mláďata (telata, selata, jehňata, hříbata, štěňata kožešinových zvířat, kuřata, kachňata, housata, krůty, papoušci, holubi atd.). Onemocnění se projevuje poškozením gastrointestinálního traktu a septikémií, v subakutních a chronických případech je doprovázeno zápalem plic a artritidou.

Patogen

Salmonella patří do čeledi Enterobacteriaceae, rodu Salmonella, který se dělí na dva druhy, enterica a bongori. Původci salmonelózy jsou malé, rovné, gramnegativní tyčinky se zaoblenými konci, netvoří spory ani tobolky, jsou pohyblivé (s výjimkou S. gallinorum-pullorum), fakultativně anaeroby. Většina salmonel roste dobře na běžných živných půdách při teplotě 37 °C. K identifikaci a odlišení od Escherichia se používá kultivace na speciálních médiích Endo, Ploskorev, Levin a bismut-sulfitagar.

Salmonella patří z hlediska odolnosti vůči chemickým dezinfekčním prostředkům do skupiny málo odolné (první skupina). Zůstávají v půdě a hnoji 9 měsíce, v pitné vodě – 10 dnů, v prachu v místnosti – 10 měsíce, v soleném a uzeném mase – 120 měsíce, v tvarohu a másle – 8 měsíců. Ve zmrazeném stavu jsou skladovány 18 měsíce, při zahřátí na 2 * C jsou skladovány až 5 minut. Na salmonelu působí destruktivně 3% horké roztoky hydroxidu sodného nebo draselného, ​​6% roztoky formaldehydu, přípravky obsahující chlór (chlorid jod, bělidlo atd.) obsahující alespoň 4% aktivního chloru, 5% peroxid vodíku a další látky s expozicí po dobu alespoň 80 hodiny.

Etiologie a patogeneze.

Na základě etiologie se rozlišují následující typy ptačí salmonelózy:
– salmonelóza způsobená S. gallinarum – pullorum (pulloroza-tyfus) a S. enteritidis (infekce Salmonella enteritidis); — salmonelóza vodního ptactva způsobená S. typhimurium; — ptačí salmonelóza způsobená sérovary Salmonella nepřizpůsobenými drůbeži (S.haifa, S.anatum, S.heidelberg, S.london atd.).

Salmonella gallinarum – pullorum způsobuje pullorózu a tyfus u kuřat, krůt, bažantů, perliček, křepelek, papoušků a ve vzácných případech i mírné alimentární toxické infekce u lidí.
Salmonelózu holubů způsobuje v 90 % případů S. typhimurium, který je jedním z hlavních původců alimentárních toxických infekcí u lidí.

U mladých zvířat do dvou týdnů věku se onemocnění vyskytuje v septické formě s příznaky gastroenteritidy. U dospělých ptáků je průběh onemocnění chronický, méně často subakutní nebo akutní. Pták, který trpěl pullorózou – tyfem – zůstává nositelem salmonely po celý život. Patogen se přenáší na potomstvo prostřednictvím vajíčka.

Salmonella enteritidis se přizpůsobila tělu kuřat a je méně často izolována z krůt, housat a jiné drůbeže. Je jedním z hlavních původců závažných toxických infekcí přenášených potravinami u lidí. Salmonella enteritidis může způsobit rozsáhlou infekci a mortalitu kuřat až 10-15 % v prvních dnech jejich života v dysfunkčních chovech. Dospělý pták onemocní asymptomaticky a zůstává, stejně jako přeživší kuřata, přenašečem a vylučovačem salmonely, přičemž patogen je převážně lokalizován ve vaječnících, játrech, slezině a tlustém střevě.

Salmonely, které vstoupily do střeva s potravou a vodou, se množí v tenkém střevě, kolonizují tlusté střevo, pronikají do osamělých folikulů a Peyerových plátů a také do mezenterických lymfatických uzlin, ze kterých se dostávají do krve. Onemocnění v takových případech probíhá jako septikémie. Pokud má tělo zvířete dostatečnou odolnost, pak pod vlivem ochranných faktorů (fagocyty, protilátky atd.) některé z patogenů zemřou v krvi. Tělo si vytváří imunitu.
Pokud je odolnost těla slabá, patogen se množí a mikrobiální buňky jsou částečně zničeny uvolněním endotoxinu.

Zánět se vyvíjí v místech rozmnožování (sliznice střev, žlučník, játra) a endotoxin způsobuje exsudativní procesy a diapedézu s následným výskytem hojných krvácení na serózních a sliznicích a vede k nekróze buněk jater, sleziny a ledviny. Možné poškození plic, kloubů, mozku, dělohy a plodu. Smrt zvířete nastává dehydratací, četnými krváceními, intoxikací a sepsí.

Klinické příznaky

Pulloróza je onemocnění převážně kuřat a ptačí tyfus je onemocnění rostoucích a dospělých kuřat a krůt. Pokud se mláďata vylíhnou z infikovaných vajec, objeví se v hnízdě (inkubátoru) umírající a mrtví ptáci. Mláďata se chovají jako somnambulisté, mají slabost, nechutenství, špatný růst a přilnavost bílých vápenitých hmot kolem kloaky. Brzy zemřou. U některých kuřat infikovaných pullorózou se onemocnění během prvních 5-10 dnů po vylíhnutí z vajíček neprojeví, ale v dalších 7-10 již prudce postupuje. V takových případech jsou ptáci velmi letargičtí, choulí se pod vyhřívacími polštářky a mají svěšená křídla. Kuřata mohou pociťovat dušnost, která je důsledkem rozsáhlé plicní patologie. Nejvyšší úmrtnost u těchto ptáků nastává ve druhém a třetím týdnu života.

Přeživší jedinci jsou zakrslí, nedostatečně vyvinutí a špatně opeření. V hejnech dospělých ptáků, kteří jako kuřata přežili vážné propuknutí choroby, je obvykle vysoké procento přenašečů infekce. Nemocná kuřata mohou také trpět slepotou, otokem tibiokalkaneálních a ulnohumerálních kloubů a kulháním v důsledku poškození kloubu. Dospělý infikovaný pták může nebo nemusí vykazovat žádné známky onemocnění. Akutní propuknutí infekce může začít náhlým snížením příjmu krmiva a ptáci sami zesmutní, jejich opeření je rozcuchané, jejich hřebeny jsou bledé a šikmé. Dalšími příznaky jsou snížená produkce vajec, snížená plodnost a líhnivost kuřat, žízeň, dehydratace a zelený až žlutozelený průjem. V závislosti na závažnosti infekce může dojít k úmrtí do 4 dnů po infekci, ale obvykle do 5-10 dnů. V prvních 1-3 dnech nemoci je možné zvýšit tělesnou teplotu o 2-3*C.
Úmrtnost na pullorózu se může pohybovat od 0 do 100 %. Největší ztráty jsou pozorovány mezi 3. a 4. týdnem života kuřat. Úmrtnost kuřat na tyfus se pohybuje mezi 10-93%.

diagnostika

Diagnóza je stanovena na základě analýzy epidemiologických, klinických a patologických údajů, jakož i výsledků bakteriologických studií. K bakteriologickému vyšetření se do laboratoře zasílají vzorky parenchymatických orgánů (játra se žlučníkem a lymfatickými uzlinami, srdce, plíce, slezina, ledviny); mezenterické lymfatické uzliny; tubulární kost; potracené plody s blanami, plodová voda, vajíčka, mrtvá těla mrtvých ptáků. Pro stanovení přenosu salmonely se vyšetřují játra a slezina. Materiálem pro intravitální diagnostiku je krev a výkaly nemocných zvířat.

Léčba

Zakoupení nebo vybraní volně žijící ptáci jsou umístěni do karantény a testováni na salmonelózu, přičemž čerstvý trus je dodáván do laboratoře. Pták je držen v izolaci a jsou dodržována opatření osobní hygieny a bezpečnosti. Ptákovi je předepsáno kompletní a vyvážené krmení. K léčbě salmonelózy lze použít sulfonamidové léky, chloramfenikol, chlortetracyklin aj. Po průběhu léčby se po 7-10 dnech provede opakovaná laboratorní diagnostika onemocnění. Používají se vakcíny. V současné době jsou známy vakcíny, které našly uplatnění v prevenci salmonelózy u holubů.

Patří sem: živá vakcína proti salmonelóze vodního ptactva, holandská vakcína proti salmonelóze a novohradské nemoci „Salmavir“, vakcína Zoosal T, inaktivovaná vakcína „Biovac“. Vakcinační prevence se aktivně využívá i v průmyslovém chovu drůbeže. K prevenci salmonelózy u holubů se používají komerční vakcíny proti salmonelóze vodní drůbeže vyrobené na bázi supresorového revertantu S. typhimurium č. 3. K imunizaci holubů se používá vakcína vyráběná společností Biavak Research and Production Company.

Vakcína se aplikuje dvakrát v intervalu 5-7 dnů perorálně nebo do prsního svalu, 1 imunizační dávka – 2 miliardy mikrobiálních buněk. Přeočkování se provádí po 5-7 dnech.

Salmonelóza u lidí

Zvířata mohou vylučovat patogen měsíce, nemocný člověk – od 3 dnů do 3 týdnů. Asi 1 % infikovaných dospělých a 5 % dětí starších 5 let je schopno vylučovat salmonelu déle než rok. Mechanismus přenosu patogenu je fekálně-orální; cestou přenosu je převážně potrava; přenosové faktory – produkty živočišného původu (maso, mléčné výrobky, vejce); Ryby a rybí produkty, stejně jako produkty rostlinného původu, mají menší epidemiologický význam; voda se na přenosu salmonel podílí převážně nepřímo. Předpokládá se možnost přenosu polétavým prachem a také přenosem v domácnosti (při zanesení do oční spojivky špinavýma rukama). Inkubační doba je od 2-6 hodin do 2-3 dnů, obvykle 12-24 hodin. S gastrointestinální formou se objevuje zimnice, bolest hlavy a svalů, tachykardie a teplota stoupá na 38-39 ° C nebo více. Současně se objevuje bolest v epi- a mezogastrium, nevolnost, opakované zvracení a častá vodnatá, páchnoucí stolice se zelení. Dehydratace, křeče a arteriální hypotenze jsou možné. U generalizované formy převažují známky intoxikace, u tyfusovité varianty průběh onemocnění připomíná paratyfus s výskytem roseolózní vyrážky 6.-7. den onemocnění a hepatolienálního syndromu, zatímco u septického variantě je charakteristická tvorba sekundárních septikopyemických ložisek s různou lokalizací. Po prodělání manifestních forem onemocnění se může rozvinout akutní (během 15-90 dnů) nebo chronický (více než 3 měsíce) nosičství.

U salmonelózy je možný i tzv. přechodný nosič, kdy klinické projevy onemocnění byly pozorovány 1-2x s odstupem jednoho dne s následnými negativními výsledky. Pacienti jsou inhibovaní a apatičtí. Obličej je bledý. U některých pacientů se 2-3 den objeví herpetická vyrážka a od 6-7 dne – roseola vyrážka s převládající lokalizací na kůži břicha. U dětí prvního roku života a osob nad 60 let je pozorován závažnější průběh salmonelózy s častějším postižením tlustého střeva v patologickém procesu, prodlouženým vylučováním bakterií, opožděnou normalizací stolice a vyšší frekvencí vývoje. zobecněných forem.